gladius

第36卷第2期

2021年4月

Vol.36No.2

Apr.2021

大连海洋大学学报

JOURNAL

OFDALIANOCEANUNIVERSITY

DOI：10.16535/.2020-316文章编号：2095-1388（2021）02-0295-08

施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察

高丽楠・2,胡红霞2”,王巍2,董颖2,吴立新1

（1.大连海洋大学水产与生命学院，大连116023；2.北京市水产科学研究所渔业生物技术北京市重点实验室，北京100068）

摘要：为深入了解鲟形目鱼类骨骼生长发育过程，探究现存唯一的软骨硬鳞鱼骨骼适应性进化，采用

软骨-硬骨双染色技术，对施氏鲟AcipenserschrenckiiBrandt仔稚幼鱼的骨骼系统进行连续观察，总结出相

应骨骼的生长发育规律及骨化时间。结果表明：施氏鲟初孵仔鱼观察不到明显的骨元件分化；仔鱼期的骨

骼元件主要集中在头部，然后逐渐长出脊索和各鳍，本阶段未观察到任何骨化骨骼；稚鱼期进入快速生长

阶段，10-15日龄时脑颅、咽颅及附肢骨骼迅速发育，身体各部分骨骼基本形成，20日龄时上颌骨、齿骨

及牙齿开始骨化，24日龄时顶骨

、

后颞骨

、下鳃盖骨、肩胛骨及背骨板外侧部分开始骨化，26日龄时翼耳

骨、锁骨、匙骨开始骨化，28日龄时颊骨、额骨、胸鳍硬棘开始骨化，30日龄时围框骨、侧骨板开始骨

化，背骨板基本完成骨化；进入幼鱼期，鱼体骨骼基础框架基本完成发育，

吻部小骨片、腹骨板，以及腹

鳍、臀鳍、背鳍、胸鳍最外侧幅状鳍条均已发生骨化

。

研究表明：

施氏鲟骨骼发育起始于孵化后，且在发

育过程中，与呼吸

（颌弓

）、摄食（

鳃弓）

和游泳能力（

鳍）相关的骨骼优先发育

，骨骼骨化顺序与发育

顺序大概一致，20日龄时首次观察到骨化的骨骼，但骨化主要集中在24-30日龄；施氏鲟骨骼骨化时间与

养殖环境、遗传等因素有关，本研究中还观测到不同批次施氏鲟骨骼骨化起始时间相差10do

关键词：施氏鲟；仔鱼；稚鱼；幼鱼；骨骼发育；骨化

中图分类号：S965.215文献标志码：A

鲟鱼起源于泥盆纪（距今4.5-3.5亿年）

，是

最早的脊椎动物类群之一，也是软骨硬鳞亚纲

Chondrostei中现仅存的唯一的目⑴，具有“活化

石”之称，在分类学上属于硬骨鱼总纲Osterich-

thyes辐鳍鱼纲Actinopterygii软骨硬鳞亚纲Chon

­

drostei鲟寻形目Acipenserif（）rmes。鲟鱼骨骼除头颅骨

外，绝大多数为软骨，是介于软骨鱼类与硬骨鱼类

之间的过渡类型，在鱼类进化史上具有重要地位,

对研究脊椎动物的起源与进化具有重要的理论意

义［I］,而对仔稚幼鱼骨骼系统的研究将使鱼类系

统演化的讨论更加深入,且能探讨各类群间的系统

发育关系［2］o目前，国内有关鲟形目鱼类骨骼系

统形态特征方面的研究报道较少，其中对白鲟Pse-

phurusgladius骨骼系统［3-5］的研究最多且较为详

细，还有学者对短吻鲟Acipenserbrevirostrum

Le-

sueur［

6］、黄鲟寻Acipenserdabryanus［

1］、达氏鲤Huso

dauricu［8］、中华寻寻AcipensersinensisGray［9］和西伯

利亚寻nstaedtii［I0］等其他种类的寻寻

形目鱼类骨骼系统形态特征进行了相关研究，但未

发现对寻鱼骨骼骨化过程的研究。

施氏鲟是中国现存寻寻鱼中最具有经济价值的优

质珍稀鱼类，其个体大、寿命长、生长速度快，是

中国最主要的寻寻鱼养殖种类，主要分布在黑龙江水

系。早在1964年就有学者对施氏寻寻Acipenser

schrenckiBrandt（原文献中称北寻寻）［II］的骨骼系统

进行了解剖研究，但在其发育过程中，骨骼骨化的

时间是未知的。本研究中，选取不同发育阶段施氏

鲟的仔稚幼鱼，采用阿尔新蓝-茜素红染色技术对

骨骼系统进行硬骨-软骨双染色，拍照、分析相应

骨骼的基本特征，并概述了骨骼骨化的时间，以期

为进一步开展不同发育阶段寻鱼骨骼系统发育的研

究奠定基础，并为其环境适应及脊椎动物的起源与

进化等相关研究提供基础资料。

1材料与方法

1.1材料

试验用施氏鲟亲鱼来自北京市水产科学研究所

收稿日期：2020-11-30

基金项目：北京市现代农业产业技术体系专项（BAIC08-2020）

作者简介：高丽楠（1995—

）,女，硕士研究生。E-mail：*****************

通信作者：胡红霞（1972—

）,女，研究员oE-mail：huhongxiazh@

296

大连海洋大学学报

第36卷

房山十渡鲟鱼繁育基地。

1.2方法

1.2.1施氏鲟仔稚幼鱼的培育试验于2020年6

月在北京市水产科学研究所房山十渡鲟鱼繁育基地

进行，曾于2019年6月在此进行过预试验。对亲

鱼进行人工催产并通过人工授精获得受精卵，用滑

石粉脱黏后，转移到孵化器中孵化。初孵仔鱼在直

径2m、高0.5m的圆形玻璃钢水槽中流水培育,

每缸放养密度8000尾鱼苗，水温（17.9±0.5）C,

pH8.0~8.2,溶解氧量4.5~5.8mg/L,养殖用水

由地下井水经曝气和充氧后使用。鱼苗孵化后7d

开口摄食，用微颗粒饲料（山东圣索饲料科技有

限公司）投喂，间隔3h投喂1次，每天投喂8

次，初期投饵量为鱼体质量的1.5%,过量投喂,

一周后根据鱼苗的生长情况、摄食情况及时调整投

饵量及更换不同粒径的饲料。投喂时水面静止30

min以上，让其充分摄食，并及时清理剩余饵料及

死去的鱼苗，保持水体清洁。

1.2.2样本的采集在前期预实验初步判定施氏

表1阿尔新蓝-茜素红S染色法

鲟骨骼发育分期的基础上，分别在12个不同的时

间点随机采集样本，即孵化后0、5、10、15、20、

22、24、26、28、30、40、50d，每个时期采集的

样本不少于5个，避免采集外形畸形的样本。用过

量的丁香酚麻醉后，采用电子天平称量体质量，用

游标卡尺测量全长，然后用体积分数为10%的福

尔马林溶液固定至少24h,以确保充分固定，之后

在室温下保存，用于骨骼染色。

1.2.3样本的骨骼染色阿尔新蓝-茜素红S染

色法是一种比较成熟的方法，该方法可以对多种生

物样本进行软骨和硬骨染色［12-14］，但是不同文献

中的方法步骤存在很大的差异［15-16］o本研究中,

在梁小毛［17］采用的阿尔新蓝-茜素红染色方法基础

上稍做改进，具体染色过程及方法如表1所示。

1.2.4骨骼染色样本的观察染色的仔稚幼鱼样

品放入加有甘油的培养皿中，用徕卡（Leica）

M205FA体视镜观察，用徕卡LASV4.8拍照系统

进行图像采集，并用AdobePhotoshopCS软件

（hop,

com）进行处理。

染色步骤stainingstep

Tab.1AlcianblueandalizarinredSstaining

technique

试验过程experimental

process

样本处理

ampletreatment

将样本鱼麻醉，称量样本质量，测量体长和全长，稍大样本固定前需解剖去除内脏，注意不要采集外形

畸形的样品

用体积分数10%的福尔马林溶液浸泡鲟鱼样本，至少24h或更长时间（根据材料大小而定），浸泡完成

固定

后用蒸馏水冲洗样本至少24h,或用自来水流水冲洗过夜，以彻底清除固定剂。再用梯度酒精溶液

fixation（30%酒精—50%酒精—75%酒精—95%酒精，均为体积分数）浸泡脱水，每个体积分数的酒精浸泡时

间至少0.5

h

酶解

zymolysis

将样本浸泡在饱和硼砂钠的胰蛋白酶溶液中，置于保温箱内，温度设置为34C左右，根据酶解程度调

整消化时间，直至稍见骨骼即可，每20

min检查一次酶解情况。其中，1.5g/L的胰蛋白酶溶液配制：

0.15g胰蛋白酶和100mL饱和硼砂钠溶液

软骨染色

cartilagestaining

用0.2g/L的阿利新蓝染色液浸泡鲟鱼样本，至少24h,期间可以更换染液。注意不要染色过度，否则

未被消化的肌肉会变蓝。其中，

0.2g/L阿利新蓝染色液配制：0.2g阿利新蓝8GN、700

mL无水乙醇

和300mL冰醋酸

水化

hydration

用梯度酒精溶液（95%酒精—75%酒精—

50%酒精—

30%酒精，均为体积分数）浸泡水化，每个体积分

数的酒精浸泡时间至少0.5h,最后将样本转移到蒸馏水中浸泡水化，可换水2~3次或更多次，每次浸

泡至少0.5

h

调节渗透压

osmoregulation

用质量分数0.5%的氢氧化钾溶液浸泡鲟鱼样本，至少0.5h,期间可更换试剂，目的是构建KOH环境

帮助茜素红S渗透入骨

硬骨染色

bonestaining

用茜素红染色剂浸泡鲟鱼样本，至少24h,注意不要染色过度，否则未被消化的肌肉会变红。其中，

0.

05g/L茜素红S溶液的配制：0.05g茜素红S和1000mL0.5%KOH溶液

保存

preservation

用蒸馏水清洗样本，然后放入甘油体积分数逐渐增加的甘油和1%（质量分数）氢氧化钾混合溶液（甘

油与1%氢氧化钾比例为1：3—1：1—3:1）中浸泡，最后保存在纯甘油中，每个比例的混合溶液浸泡

时间至少为24h，期间可更换试剂

第2期

高丽楠，等：施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察

297

2结果与分析

2.1施氏鲟骨骼系统的组成

本研究中参照孟庆闻等［3］及李怀明等［II

］的研

究，对施氏寻寻骨骼系统进行了概述和标注，其分为

主轴骨骼(axialskeleton)和附肢骨骼(appendic­

ularskeleton)两部分，主轴骨骼由头骨(skull)、

脊柱(vertebralcolumn)和肋骨(rib)组成，附

肢骨骼由带骨(girdle)、支鳍骨骼(pterygiophore)

和鳍条(fin-ray)组成。

2.1.1主轴骨骼脑颅(neurocranium):施氏鲟

幼鱼的脑颅较为宽长，整体呈纺锤形，内层由整块

的软骨构成，而外层覆盖硬骨质膜片，且在吻部至

鼻孔背面有许多吻部小骨片。主要膜骨骨片有鼻窝

上方一对长方形的额骨，两额骨间夹有2小块近椭

圆形的中额骨，其后方中央有一对颇长的顶骨，顶

骨外侧是一对长方形的翼耳骨；后端枕骨区有正中

的上枕骨和两侧的外枕骨，外枕骨后外侧为后颖

骨；眼窝上方为眶上骨，其前后及腹面围有小的围

眶骨。脑颅腹面正中有发达的副蝶骨

，侧面有一系

列的鳃盖骨片。

咽颅(splanchnocranium)：施氏寻寻咽颅骨化程

度较少，大部分为软质骨。咽颅分为颌弓(arcus

mandibularis)、舌弓(arcus

hyoideus)和鳃弓(ar­

cusbranchialis)3个区域。施氏寻寻的颌弓分背腹两

面，背面为上颌，腹面为下颌，上颌由上颌骨、方

轭骨和颚方软骨组成，下颌由齿骨、关节骨和米克

尔氏软骨组成。施氏鲟的舌弓由舌颌骨、关节骨、

角舌骨、下舌骨和间舌骨等构成。施氏鲟主要有5

对鳃弓。

脊柱(columnavertebralis)：施氏寻寻的脊索呈

圆柱形，贯穿全身，终生存在，位于脊髓的腹面,

没有真正的椎体，周围被加厚的脊索鞘包围。按形

态不同可将脊柱分为躯干部脊柱和尾部脊柱。肋骨

位于躯干部脊柱的两侧，每根肋骨一端与脊柱的横

突相连，另一端游离。

2.1.2附肢骨骼施氏鲟的肩带位于脏颅的后方

两侧，支持胸鳍，由膜质的上匙骨、匙骨、乌喙

骨、乌喙部软骨和肩胛部软骨组成。背鳍位于尾部

的背侧，比臀鳍略前，与身体垂直，呈三角形；臀

鳍位于腹面正中央，前缘正对背鳍中部，距肛门较

远，鳍与身体背腹面平行；胸鳍小呈圆形［I8］,位

于头后体腹的两侧，与身体垂直相交；腹鳍位于肛

门前的腹部两侧，与身体垂直相交，长度仅为胸鳍

的一半；尾鳍为歪尾形，尾部椎骨向上弯曲，将尾

鳍分为上下两叶，基部分叉，下叶较发达，上叶边

缘有一排棘状鳞。

2.2施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统的染色观察

根据鱼类的形态特征，鱼类早期发育可分为仔

鱼期、稚鱼期和稚鱼期。鲟鱼仔鱼期一般指孵化后

至开口摄食的阶段，稚鱼期则指开口摄食至鱼体表

五列骨板形成的阶段。也有人把仔鱼称为前期仔

鱼，

稚鱼则称为后期仔鱼

。幼鱼则是指体表五列骨

板已长至尾柄基部，外观上具备成鱼体型的鲟

鱼［

I9-20］

2.2.1仔鱼期刚孵化(图1)的仔鱼长(11.49土

0.10)mm,头部较小，身体纤细透明，卵黄囊呈

椭圆形，原始鳍褶将躯干部和尾部分开，口和鳃裂

还未形成，嗅觉、味觉等感觉器官也未发育，但可

见有色眼睛，此阶段不存在硬骨元件。

5日龄(图2)仔鱼全长(17.21±0.20)mm,

存在的骨骼元件主要集中在头部，头骨及身体后半

部分的色素沉积明显增多。吻部清晰可见，前端有

须4根。眼睛呈深色，哑铃形状的鼻孔出现。鳃盖

尚未将鳃全部覆盖住，鳃丝露出鳃盖。各鳍均已形

成，卵黄囊消耗产生的残留物在螺旋瓣后段可见。

脊索呈圆柱形，贯穿全身。

2.2.2稚鱼期10日龄(图3)稚鱼全长

(21.97±0.30)mm,鱼体已经开口摄食，身体各

部分骨骼发育更加完善。出现了新的形态特征，背

骨板及各鳍的幅状软骨形成，卵黄囊明显消失，鳃

盖清晰可见，舌弓的角舌骨、鳃弓的角鳃软骨也是

本阶段可观察到的结构。视网膜部分呈金色，身体

各部分色素明显增多。

15日龄(图4)稚鱼全长(22.45±0.60)mm,

咽颅发育良好，牙齿、侧骨板形成。尾部的椎骨末

端向背上方弯曲，形成歪型尾。

20日龄(图5)稚鱼全长(23.20±2.00)mm,

身体各部分骨骼基本形成，形态上无明显变化。骨

骼骨化过程在本阶段逐渐开始，上颌骨、齿骨及牙

齿最先骨化。

22日龄稚鱼全长(23.75±2.00)mm,此阶段未

发现头部及躯干部的重大变化。

24日龄(图6)稚鱼全长(26.14±4.00)mm,

形态上无明显变化。顶骨、后颖骨、下鳃盖骨、肩

胛骨及背骨板外侧部分开始骨化。

26日龄(图7)稚鱼全长(32.36±3.00)mm,

形态上无明显变化。翼耳骨、锁骨、匙骨开始骨化。

298

大连海洋大学学报

第36卷

图1施氏鲟孵化后Od骨骼发育

Fig.1

SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens­

erschrenckiiOdayposthatching(DPH)

B

C

A—侧面观；B—背面观；c—腹面观；pq—腭方软骨；me—米克

尔氏软骨。

A——sideview；B——

dorsalview；C——ventral

view；pq——palatoquad­

rate；mc一Meckel'scartilage.

图2施氏鲟孵化后5d骨骼发育

erschrenckii5DPH

Fig.2SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens-

A—侧面观；B—背面观；C—腹面观；ds—背骨板；r—幅状软

骨；ch—角舌骨；cb—角鳃软骨°

A——sideview；B——dorsalview；C——ventralview；ds——

dorsalscute

；

r—

—radialium；ch——ceratohyale；cb

——ceratobranchial.

图3施氏鲟孵化后1Od骨骼发育

Fig.3SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens-

er

schrenckii1ODPH

28日龄（图8）稚鱼全长（36.83±4.00）mm,

形态上无明显变化。颊骨、额骨、胸鳍硬棘开始骨

化。

30日龄（图9）稚鱼全长（39.75±4.00）mm,

器官分化完全，外观与成鱼相似，出现了一些新的

幼体特征，如纵向排列的骨板、腹面扁平的身体、

细长的触须及歪型尾等。围眶骨、侧骨板开始骨化，

A—侧面观；B—背面观；C—腹面观；ls

—侧骨板；t—牙齿。

A

—sideview；B—

dorsalview；C—ventralview；ls—lateralscute；

t一teeth.

图4施氏鲟孵化后15d骨骼发育

Fig.4

SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens-

er

schrenckii15DPH

A一侧面观；B一背面观；C一腹面观；m一上颌骨；d—齿骨。

A—sideview；B—

dorsalview；C—ventralview；m—maxilla；d

—

dentary.

图5施氏鲟孵化后2Od骨骼发育

Fig.5SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens-

erschrenckii2ODPH

A—sideview；B—

dorsalview；C

—ventral

view；p—parietal；pt

—

posttermporal；so—

—

suboperculum；s——scapula.

图6施氏鲟孵化后24d骨骼发育

Fig.6SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens-

erschrenckii24DPH

背骨板基本完成骨化。

2.2.3幼鱼期40日龄（图10）幼鱼全长（76.26土

第2期

高丽楠，等：施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察

299

A—侧面观；B—背面观；C—腹面观；cl—匙骨；clv

—锁骨;

pte—翼耳骨。

A

—sideview；B—

dorsalview；C—ventral

view；cl—cleithrum

；

clv——clavicle；pte——pteroticbone.

图7施氏鲟孵化后26d骨骼发育

Fig.7SkeletaldevelopmentofAmursturgeon

Acipens-

erschrenckii26DPH

；；理触IT

A1mm

pte

bclv

A—侧面观；B—背面观；C—腹面观；f—额骨；j—颊骨；sp

—

棘。

A

一sideview；B一dorsal

view；C一ventralview；f—frontal；j—ju­

gal；sp一

spina.

图8施氏鲟孵化后28d骨骼发育

Fig.8SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens-

er

schrenckii28DPH

A—侧面观；B—背面观；C—腹面观；c—围眶骨。

A

—

—side

view；B——dorsalview；C——ventral

view；c

——circumorbital.

图9施氏鲟孵化后30d骨骼发育

Fig.9SkeletaldevelopmentofAmursturgeonAcipens-

erschrenckii30DPH

4.00)mm,骨骼基础框架基本完成发育，各器官

分化完全，外形向成体过渡。尾部椎骨向上弯曲,

将尾鳍分为上下两叶，基部分叉，下叶较发达，上

叶边缘有一排棘状鳞，其下为背辐状软骨。吻部小

骨片、腹骨板，以及腹鳍、臀鳍、背鳍、胸鳍最外

侧幅状鳍条均已发生骨化。

50日龄(图11)幼鱼全长(105.32±

5.00)mm,身体各部分进一步发育，未见新骨化

骨骼。

A

B

C

1mm

A—侧面观；B—背面观；C—尾鳍发育；vs—腹骨板；or—吻部

小骨片；fu一棘状鳞：fr一鳍条。

A—side

view；B

—

dorsal

view；C

—caudalfindevelopment；vs

—

ventralscute；or一

ossiculirostralia；fu一fulcra；fr一fin

ray.

图10施氏鲟孵化后

40d骨骼发育

Fig.10Skeletal

developmentofAmursturgeonAci-

penserschrenckii40DPH

图11施氏鲟孵化后

50d骨骼发育

Fig.11Skeletal

developmentofAmursturgeonAci-

penserschrenckii50DPH

3讨论

3.1施氏鲟骨骼系统发育的功能适应性

骨骼发育起始于骨化前软骨的形成，并且与仔

稚幼鱼不同时期的功能需求密切相关［21］o饥饿和

被捕食是影响仔稚幼鱼存活的主要影响因素［22-25］,

因此，在长期的进化过程中形成了与生存相关的器

官优先发育的发育模式［26］。

本研究中，在施氏鲟仔鱼期，与摄食和呼吸相

关的米克尔氏软骨、腭方骨、角舌骨、角鳃软骨已

经形成，且在仔鱼期未观察到任何骨化骨骼。伴随

着外源性摄食的开始，稚鱼期进入快速生长阶段,

脑颅、咽颅及附肢骨骼迅速发育。施氏鲟20日龄

时第一次观察到骨化的骨骼，为上颌骨、齿骨及牙

齿，大大增强了鱼苗的摄食能力，脑颅其他骨骼的

300

大连海洋大学学报

第36卷

骨化在此阶段刚刚开始并逐步增加。24日龄时，

施氏鲟稚鱼顶骨、后颖骨、下鳃盖骨及背骨板外侧

部分开始骨化，头骨及背骨板的骨化在早期发育中

具有重要的防御作用［27］o附肢是鱼体游泳运动重

要的协调器官，施氏鲟稚鱼肩胛骨、胸鳍硬棘、侧

骨板分别在26、28、30日龄时开始骨化，此时游

泳能力极大提高，躲避敌害、主动寻找食物和攻击

捕食者能力均随之提高。进入幼鱼期，鱼体骨骼基

础框架基本完成发育，吻部小骨片、腹骨板，以及

腹鳍、臀鳍、背鳍、胸鳍最外侧幅状鳍条均已发生

骨化，鱼体活动更加灵活多变，能够伏击或跟踪饵

料鱼，遇到敌害后也能逃避藏匿［28］o

3.2施氏鲟骨骼系统发育与其他鲟鱼的比较

头骨骨化较为复杂，本研究中，施氏鲟在20

日龄时第一次观察到骨化的骨骼，为上颌骨、齿骨

和牙齿，随后头部其他部位的骨骼相继骨化，且骨

化的牙齿在26日龄时就已消失，施氏鲟在仔稚鱼

时期存在犬齿状牙齿［

29-30

］,成体则没有任何牙

齿［31］。施氏鲟与波斯鲟Acipenserpersicus［15

］A西伯

利亚鲟［32］的骨化部位及顺序相一致，但波

斯鲟骨化时间较早，在12日龄时就已经观察到上

述骨骼的骨化。

骨板骨化顺序从背骨板开始，然后是侧骨板,

最后是腹侧骨板，且由远端向近端逐渐骨化。本研

究中，施氏鲟背骨板在24日龄时开始骨化，侧骨

板和腹骨板分别在30、40日龄时观察到骨化。西

伯利亚鲟［33

］骨板骨化的时间与施氏鲟相近，背骨

板、侧骨板和腹骨板分别在25、31及37日龄时骨

化。杂交鲟HusohusoXAcipenserruthenus［34］骨板的

骨化晚于上述两种鲟鱼，背骨板在59日龄时开始

骨化，侧骨板和腹骨板均在91日龄时观察到骨化。

各鳍骨化方式一致，均由基部向末梢骨化。本

研究中，施氏鲟5日龄时各鳍均已形成，40日龄

时观察到各鳍鳍条的骨化。而在杂交鲟

us［34］中，背鳍和臀鳍在4日龄时形成，胸

鳍在6日龄时出现，上述各鳍鳍条均在59日龄时

骨化，腹鳍、尾鳍在10日龄时形成，鳍条在91日

龄时骨化。

由此可见，不同种类的鲟鱼，其骨骼骨化的时

间节点有所差异，可能是生长环境［35］、饵料投喂、

鱼卵大小与质量［36］及地理隔离所造成的种族差异

等原因所导致⑶］。

此外，本次繁育的施氏鲟骨骼骨化时间相比

2019年作者在前期预试验中繁育的施氏鲟早10d

（图12、图13）,2019年繁育的施氏鲟在30日龄

时才观察到骨化的骨骼，而本研究中在20日龄时

就观察到骨化的骨骼。由此可见，即使同种鲟鱼其

骨化时间也会因环境或遗传因素等有所差异，本研

究中提供了施氏鲟早期骨骼发育进程的大致时间范

围。

A—侧面观；B—背面观；C—腹面观。

A

——sideview；B——

dorsal

view；C——ventralviewd.

图12施氏鲟孵化后25d骨骼发育

(2019年)

Fig.12Skeletal

developmentofAmursturgeonAci­

penserschrenckii25DPH(2019)

A

1mm

JI

0“

B

c*

A—侧面观；B—背面观；C—腹面观。

A—

—sideview；B——

dorsalview；C——ventralviewd.

图13施氏鲟孵化后30d骨骼发育（2019年）

Fig.13Skeletal

developmentofAmursturgeonAci­

penserschrenckii30DPH（2019）

本研究中采用软骨-硬骨双染色技术确定施氏

鲟骨骼骨化的时间，但在发育早期，骨中钙量不

足，可能无法通过茜素红染色［34］,且进入稚鱼期

后，肌肉并不能完全被清除，因此，作者推测骨化

开始的时间可能比染色观察到的时间更早一些，今

后还需进一步对不同发育阶段的软骨和硬骨组织进

行相关功能基因的定量分析，确定其出现及骨化时

间。

4结论

1）本研究中首次对施氏鲟仔稚幼鱼进行了不

第2期

高丽楠，等：施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察

301

同发育时期骨骼染色观察。施氏鲟骨骼发育起始于

孵化后

，且在发育过程中，与呼吸（颌弓）、摄食

（鳃弓）和游泳能力（鳍）相关的骨骼优先发育,

骨骼骨化顺序与发育顺序大概一致。

2）仔鱼期未观察到任何骨化骨骼。

3

）稚鱼期进入快速生长阶段，20日龄时观察

到开始骨化的骨骼，为上颌骨、齿骨及牙齿。骨化

主要集中在24~30日龄。进入幼鱼期，鱼体骨骼

基础框架基本完成发育，鱼体活动更加灵活多变。

4）施氏鲟骨骼骨化时间与养殖环境、遗传等

因素有关。本研究中观测到不同批次施氏鲟骨骼骨

化起始时间相差10do

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Observationofskeletal

systemdevelopmentoflarvaland

juvenileAmursturgeonAcipenserschrenckii

GAOLinan1，2,HUHongxia2*,WANGWei2,DONGYing2,WU

Lixin1

(eofFisheriesandLifeScence,DalianOceanLniversity,Dalian

116023,China；

Laboratoryof

Fishery

Biotechnology,BeijingFisher­

iesResearchInstitute,Beijing100068,China)

Abstract:In

ordertoimprovetheunderstandingofskeletongrowthanddevelopmentofAcipenseriformes,andto

explore

theadaptive

evolutionoftheonlyexistingchondrostean，

skeletalsystem

ofAmursturgeonAcipenser

schrenckiiwas

continuouslyobservedfrom

newlyhatchedlarvaetojuvenilefishusingthecartilage-bonedoublestai­

ningtechnique,andthe

growthanddevelopmentschedulewassummarizedaccordingtotheossificationtimeof

obvious

differentiationofboneelementswasobservedin

thenewlyhatchedlarvae，andskeletalele­

mentsweremainlydistributed

onlyonthehead，

andthennotochordandfins，

without

enile

Amur

sturgeonturnedintorapidgrowthstage，neurocranium，splanchnocraniumandappendicular

skeleton

devel

­

opedrapidly,andtheskeletonin

allpartsofthebodywerebasically

formedat10-15daysposthatched(dph).At

20dph，themaxilla，dentaryand

teethbegantoossify；

at

24dph，theparietal

，

posttermporal

，suboperculum，

scapulaandthelateralpartofdorsalscuteappearedtobegintoossify；

at26dph，thescapula，dorsalscutewas

completelyossified，andthepterotic

，28dph，jugal，

frontalandspina

ofthepectoralfins

began

to

30dph，thepostorbitalbegantoossify；thelateralscute

wascompletely

thejuvenilefishstage，theframework

iculi

rostralia

，ventralscute，and

theradialiaofpelvicfin，analfin，dorsalfin，and

pectoralfinwereossifiedcomplete­

lusion

，thebonedevelopmentofAmur

sturgeonbeganafterhatching，andthebonesrelatedto

breathing

(

arcusmandibularis)，feeding(arcusbranchialis)andswimming

ability(fins)were

developedpreferentiallydur

­

ingthedevelopment，andtheorderof

ossifiedbonewasfirstobserved

at20dph,withthepeakossificationat24-30dph,andtheossificationtimebeing

involvedinthe

breedingenvironment,

thisstudy,there

was10daysdifferenceinthe

boneossificationinitiationtimeindifferentbatchesofartificialspawninginAmursturgeon.

Keywords:Acipenserschrenckii；larvafish；juvenilefish；youngfish；skeleton

development；ossify